Meningoencephalitis caused by Bovine alphaherpesvirus 5 in Pernambuco, Brazil / [Meningoencefalite causada pelo Bovine alphaherpesvirus 5 em Pernambuco, Brasil]

Objetivou-se descrever a ocorrência do Bovine alphaherpesvirus 5 (BoHV5) como causa de meningoencefalite não supurativa em bovinos do estado de Pernambuco, Brasil. Para tanto, 32 amostras de sistema nervoso embebidas em parafina foram obtidas de animais acometidos por doenças neurológicas atendidos na Clínica de Bovinos de Garanhuns da Universidade Federal Rural de Pernambuco (CBG-UFRPE), entre 2012 e 2016. As amostras foram analisadas quanto à presença do gene da glicoproteína C do BoHV5 por reação em cadeia da polimerase (PCR). Dois animais (6,25%) tiveram resultado positivo à PCR, e sua análise de sequenciamento indicou 100% de similaridade para o BoHV5. Os resultados histopatológicos desses dois animais revelaram lesões multifocais de meningoencefalite não supurativa associada à polioencefalomalácia, presença de corpúsculos de inclusão basofílicos, infiltração de células de Gitter e presença de manguitos perivasculares. A PCR se mostra uma importante ferramenta para diferenciação das infecções por BoHV5 de outras enfermidades neurológicas de bovinos, especialmente a raiva.(AU)

Suppurative infectious diseases of the central nervous system in domestic ruminants / Doenças infecciosas supurativas do sistema nervoso central de ruminantes domésticos

This study describes suppurative infectious diseases of the central nervous system (CNS) in domestic ruminants of southern Brazil. Reports from 3.274 cattle, 596 sheep and 391 goats were reviewed, of which 219 cattle, 21 sheep and 7 goats were diagnosed with central nervous system inflammatory diseases. Suppurative infectious diseases of the CNS corresponded to 54 cases (28 cattle, 19 sheep and 7 goats). The conditions observed consisted of listerial meningoencephalitis (8 sheep, 5 goats and 4 cattle), suppurative leptomeningitis and meningoencephalitis (14 cattle, 2 goats and 1 sheep), cerebral (6 cattle and 2 sheep), and spinal cord (7 sheep) abscesses, and basilar empyema (4 cattle and 1 sheep). Bacterial culture identified Listeria monocytogenes (9/54 cases), Escherichia coli (7/54 cases), Trueperella pyogenes (6/54 cases) and Proteus mirabilis (1/54 cases). All cases diagnosed as listeriosis through histopathology yielded positive immunostaining on immunohistochemistry, while 12/17 of the cases of suppurative leptomeningitis and meningoencephalitis presented positive immunostaining for Escherichia coli. Meningoencephalitis by L. monocytogenes was the main neurological disease in sheep and goats, followed by spinal cord abscesses in sheep. In cattle, leptomeningitis and suppurative meningoencephalitis was the most frequent neurological disease for the species, and E. coli was the main cause of these lesions. Basilar empyema, mainly diagnosed in cattle, is related to traumatic injuries, mainly in the nasal cavity, and the main etiologic agent was T. pyogenes.(AU)

Neste trabalho são descritas as doenças neurológicas infecciosas supurativas de ruminantes domésticos na Região Sul do Brasil. Foram avaliados laudos de 3.274 bovinos, 596 ovinos e 391 caprinos, dos quais 219 bovinos, 21 ovinos e sete caprinos foram diagnosticados como doenças inflamatórias no sistema nervoso central. As doenças neurológicas infecciosas supurativas corresponderam a 54 casos (28 bovinos, 19 ovinos e sete caprinos). As enfermidades observadas foram meningoencefalite por Listeria monocytogenes (oito ovinos, cinco caprinos e quatro bovinos), leptomeningite e meningoencefalite supurativa (14 bovinos, dois caprinos e um ovino), abscessos cerebrais (seis bovinos e dois ovinos) e medulares (sete ovinos); e empiema basilar (quatro bovinos e um ovino). Através do isolamento bacteriano foram identificados: L. monocytogenes (9/54 casos), Echerichia coli (7/54 casos), Trueperella pyogenes (6/54 casos) e Proteus mirabilis (1/54 casos). Todos os casos diagnosticados como listeriose por histologia foram positivos na imuno-histoquímica para L. monocytogenes, e 12/17 casos de leptomeningite e meningoencefalite supurativa foram positivos na imuno-histoquímica para E. coli. A meningoencefalite por L. monocytogenes representou a principal enfermidade neurológica em ovinos e caprinos, seguido dos abscessos medulares em ovinos. A leptomeningite e meningoencefalite supurativa foi a doença neurológica supurativa mais frequente em bovinos e o principal agente causador da lesão foi E. coli. O empiema basilar, frequentemente, diagnosticado em bovinos, foi relacionado com lesões traumáticas, principalmente, de cavidade nasal e o principal agente causador foi T. pyogenes.(AU)

Retrospective study of Bovine herpesvirus 5 meningoencephalitis in cattle from São Paulo State, Brazil / Estudo retrospectivo de meningoencefalite por herpesvírus bovino-5 em bovinos do estado de São Paulo, Brasil

Meningoencephalitis caused by Bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) is an important neurological disease that affects Brazilian cattle herds. The present study investigated the presence of BoHV-5 DNA in cattle diagnosed with meningoencephalitis at Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, UNESP - Univ Estadual Paulista from 1980 to 2009. The records obtained from the Large Animal Internal Medicine Service and the Animal Pathology Service were reviewed to identify clinical and epidemiological data from cattle with neurological signs. Excluding rabies cases, we found 115 cases of cattle with neurological signs that had been necropsied. Non-suppurative meningoencephalitis was diagnosed in 28 animals of the 115 initially selected based on histopathological examination of brain tissues. Of these 28 animals, 15 (54%) were positive for BoHV-5 DNA by polymerase chain reaction (PCR) of formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) brain samples. PCR target was 159-bp fragment from the BoHV-5 glycoprotein C gene. The oldest case identified in the present study was from 1988. PCR was a good tool for the diagnosis of BoHV-5 DNA extracted from FFPE tissues, allowing retrospective studies of samples stored for more than 20 years.(AU)

A meningoencefalite por herpesvírus bovino-5 (BoHV-5) é uma doença neurológica importante no rebanho bovino brasileiro. Este estudo tem por objetivo verificar a presença do DNA de BoHV-5 em bovinos diagnosticados com meningoencefalite na Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade Estadual Paulista, entre os anos de 1980 e 2009. Foram revisados os arquivos do Serviço de Clínica de Grandes Animais e da Patologia Animal em busca dos dados clínicos e epidemiológicos de bovinos com sinais neurológicos. Excluídos os casos de raiva, foram encontrados 115 casos de bovinos com sinais neurológicos, que foram necropsiados. O exame histopatológico realizado nos tecidos encefálicos desses animais constatou lesões de meningoencefalite não supurativa em 28 animais. Destes, em 15 (54%) casos foi identificada a presença do DNA de BoHV-5 por meio de PCR realizada em amostras de tecido encefálico fixadas em formalina e incluídas em parafina (FFPE). O alvo da PCR foi um fragmento de 159 pb do gene da glicoproteína C do BoHV-5. O caso mais antigo identificado neste estudo foi de 1988. A PCR apresentou-se como boa ferramenta para o diagnóstico do DNA de BoHV-5 extraído de tecidos FFPE, possibilitando estudos retrospectivos e diagnóstico de amostras com mais de 20 anos de armazenamento.(AU)

Histophilus somni-induced thrombotic meningoencephalitis in cattle from northern Paraná, Brazil / Meningoencefalite trombótica-induzida por Histophilus somni em bovinos da região norte do Paraná

Thrombotic meningoencephalitis (TME) is a fatal neurological disease of cattle, predominantly from North America, that is caused by Histophilus somni with sporadic descriptions from other countries. This manuscript describes the occurrence of spontaneous TME in cattle from northern Paraná, Brazil. Most cattle had acute neurological manifestations characteristic of brain dysfunction. Hematological and cerebrospinal fluid analyses were not suggestive of bacterial infections of the brain. Histopathology revealed meningoencephalitis with vasculitis and thrombosis of small vessels that contained discrete neutrophilic and/or lymphocytic infiltrates admixed with fibrin at the brainstem, cerebral cortex, and trigeminal nerve ganglion of all animals. All tissues from the central nervous system used during this study were previously characterized as negative for rabies virus by the direct immunofluorescence assay. PCR and RT-PCR assays investigated the participation of infectious agents associated with bovine neurological disease by targeting specific genes of H. somni, Listeria monocytogenes, bovine herpesvirus -1 and -5, bovine viral diarrhea virus, and ovine herpesvirus-2. PCR and subsequent sequencing resulted in partial fragments of the 16S rRNA gene of H. somni from brain sections of all animals with histopathological diagnosis of TME; all other PCR/RT-PCR assays were negative. These findings confirmed the participation of H. somni in the neuropathological disease observed in these animals, extend the geographical distribution of this disease, and support previous findings of H. somni from Brazil.(AU)

Meningoencefalite trombótica (Thrombotic meningoencephalitis- TME) é uma doença neurológica fatal de bovinos ocasionada por Histophilus somni. A infecção tem sido descrita predominantemente na América do Norte e de forma esporádica em outros países. O objetivo deste estudo é relatar a ocorrência de TME em bovinos da região norte do estado do Paraná, Brasil. A maioria dos animais apresentaram sinais clínicos neurológicos característicos de disfunção cerebral aguda. Análises hematológicas e do fluido cerebrospinal não foram sugestivas de infecção bacteriana do cérebro. A histopatologia revelou meningoencefalite com vasculite e trombose de pequenos vasos com discreto infiltrado neutrofílico e/ou linfocítico mesclada com fibrina no tronco e córtex cerebral e no gânglio do nervo trigêmio de todos os animais. As amostras de sistema nervoso central incluídas nesse estudo foram previamente caracterizadas como negativas para raiva por meio de técnica de imunofluorescência direta. A participação de agentes infecciosos associados à doença neurológica em bovinos foi avaliada por técnicas moleculares como PCR e RT-PCR para amplificação parcial de genes de H. somni, Listeria monocytogenes, herpesvírus bovino 1 e 5, vírus da diarreia viral bovina e herpesvírus ovino 2. As seções do cérebro de todos os animais com diagnóstico histopatológico de TME foram positivas em PCR para a detecção do gene 16S rRNA de H. somni. O sequenciamento dos produtos amplificados confirmou a presença de DNA de H. somni nos fragmentos de cérebro avaliados. As reações de PCR/RT-PCR para todos os outros micro-organismos avaliados resultaram negativas. Os resultados desse estudo confirmaram a participação do H. somni nos episódios de doença neurológica observada nos animais avaliados, amplia a distribuição geográfica da TME e ratifica estudos prévios realizados no Brasil que demonstraram a presença de H. somni em outras formas de manifestação clínica das infecções por essa bactéria.(AU)

Histopathological, immunohistochemical, and molecular study of BHV-5 infection in the central nervous system of experimentally infected calves / Estudo histopatológico, imuno-histoquímico e molecular da infecção por BHV-5 no sistema nervoso central de bovinos experimentalmente infectados

Bovine meningoencephalitis caused by BHV-5, a double-stranded DNA enveloped virus that belongs to the family Herpesviridae and subfamily Alphaherpesvirinae, is an important differential diagnosis of central nervous diseases. The aim of this study was to describe the histological changes in the central nervous system of calves experimentally infected with BHV-5 and compare these changes with the PCR and IHC results. Formalin-fixed paraffin-embedded central nervous system samples from calves previously inoculated with BHV-5 were microscopically evaluated and tested using IHC and PCR. All the animals presented with nonsuppurative meningoencephalitis. From 18 evaluated areas of each calf, 32.41% and 35.19% were positive by IHC and PCR, respectively. The telencephalon presented more accentuated lesions and positive areas in the PCR than other encephalic areas and was the best sampling area for diagnostic purposes. Positive areas in the IHC and PCR were more injured than IHC and PCR negative areas. The animal with neurological signs showed more PCR- and IHC-positive areas than the other animals.(AU)

A meningoencefalite bovina causada pelo BHV-5, um vírus DNA fita dupla envelopado que pertence à família Herpesviridae e subfamília Alphaherpesvirinae, é um importante diagnóstico diferencial das doenças do sistema nervoso central. O objetivo deste estudo foi descrever as alterações histológicas no sistema nervoso central de bovinos experimentalmente infectados com BHV-5 e comparar estas alterações com os resultados de imunoistoquímica (IHQ) e PCR. Amostras do sistema nervoso central de bezerros previamente inoculados com BHV-5 foram microscopicamente avaliadas e submetidas à IHQ e PCR. Todos os animais apresentaram meningoencefalite não-supurativa. Das 18 áreas avaliadas de cada bezerro, 32,41% e 35,13% foram positivas na IHQ e PCR, respectivamente. O telencéfalo apresentou lesões mais acentuadas e foi mais positivo na PCR do que as demais áreas encefálicas e se apresentou como a melhor área para coleta de material para o diagnóstico. As áreas positivas na IHQ e na PCR apresentaram lesões mais acentuadas do que as áreas negativas para as mesmas técnicas. O animal com sinais neurológicos apresentou mais áreas positivas para PCR e IHQ do que os demais animais.(AU)

Listeriose em ovinos associada ao consumo de silagem no Rio Grande do Norte / Listeriosis in sheep linked to silage consumption in Rio Grande do Norte

O relato objetivou descrever os achados epidemiológicos, clínico-patológicos, laboratoriais e microbiológicos em um surto de meningoencefalite em ovinos por Listeria monocytogenes associado ao consumo de silagem. A enfermidade acometeu oito ovinos pertencentes a um rebanho de 600 animais, alcançando letalidade de 100%. A única ovelha examinada apresentou apatia, febre, cegueira bilateral com midríase, hipotonia lingual, nistagmo e torneio à direita com quedas esporádicas. A hematologia revelou linfopenia absoluta com inversão na relação de linfócito / neutrófilo (0,16). A análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) mostrou aspecto turvo e pleocitose neutrofílica (92 leucócitos/µL). L. monocytogenes foi isolada em quatro alíquotas de LCR submetidas à cultura microbiológica. Em quatro ovinos necropsiados, as lesões macroscópicas consistiram de congestão das meninges e turbidez do LCR. Microscopicamente, a principal característica foi meningoencefalite do troco encefálico, bulbo, ponte, mesencéfalo e medula oblonga, com microabscessos multifocais e gliose. Infiltrado neutrofílico e linfocítico multifocal nos fascículos do nervo trigêmeo foi também observado. Os autores reiteram a importância das medidas preventivas, a fim de reduzir a incidência da listeriose.

This report aimed to describe epidemiological, clinical-pathological, laboratorial and microbiological findings in an outbreak of meningoencephalitis in sheep due to L. monocytogenes linked to silage consumption. The disease affected eight sheep from a 600 sheep flock, achieving 100% lethality. The only ewe examined presented apathy, fever, bilateral blindness with mydriasis, tongue hypotony, nystagmus and right circling with sporadic falls. Hematology revealed absolute lymphopenia with inversion in the lymphocyte/neutrophil ratio (0.16). Cerebrospinal fluid (CSF) analysis showed turbid aspect and neutrophilic pleocytosis (92leukocytes/µL). L. monocytogenes was isolated from four CSF samples submitted to microbiological assays. In four necropsied sheep, gross lesions included meningeal congestion and CSF clouding. Microscopically, the main feature was meningoencephalitis of the brainstem, bulb, pons, mesencephalus and medulla oblongata, with multifocal microabscesses and gliosis. Multifocal lymphocyticand neutrophilic infiltrate in the trigeminal nerve fascicles was also observed. The authors reiterate the importance of adequate preventive measures to reduce incidence of listeriosis.

Histopathological and molecular characterization of encephalitic listeriosis in small ruminants from northern Paraná, Brazil

Listeriosis is a disease primarily of ruminants caused by the Gram-positive bacterium Listeria monocytogenes. Ruminants either demonstrate manifestations of the encephalitic, septicemic, or reproductive form of listeriosis. The pathological and molecular findings with encephalitic listeriosis in a 5.5-month-old, male, mixed-breed goat and a 3-year-old Texel-crossed sheep from northern Paraná, Brazil are described. Clinically, the kid demonstrated circling, lateral protrusion of the tongue, head tilt, and convulsions; the ewe presented ataxia, motor incoordination, and lateral decumbency. Brainstem dysfunctions were diagnosed clinically and listeriosis was suspected. Necropsy performed on both animals did not reveal remarkable gross lesions; significant histopathological alterations were restricted to the brainstem (medulla oblongata; rhombencephalitis) and were characterized as meningoencephalitis that consisted of extensive mononuclear perivascular cuffings, neutrophilic and macrophagic microabscesses, and neuroparenchymal necrosis. PCR assay and direct sequencing, using genomic bacterial DNA derived from the brainstem of both animals, amplified the desired 174 base pairs length amplicon of the listeriolysin O gene of L. monocytogenes. Phylogenetic analyses demonstrated that the strains associated with rhombencephalitis during this study clustered with known strains of L. monocytogenes lineage I from diverse geographical locations and from cattle of the state of Paraná with encephalitic listeriosis. Consequently, these strains should be classified as L. monocytogenes lineage I. These results confirm the active participation of lineage I strains of L. monocytogenes in the etiopathogenesis of the brainstem dysfunctions observed during this study, probably represent the first characterization of small ruminant listeriosis by molecular techniques in Latin America, and suggest that ruminants within the state of Paraná were infected by the strains of the same lineage of L. monocytogenes.

Intoxicação por sal em suínos: aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos e breve revisão de literatura / Salt poisoning in swine: epidemiological, clinical and pathological aspects and brief review of the literature

Salt poisoning occurs commonly in pigs by excessive intake of sodium chloride or by a period water deprivation for followed by free access to water. The objective of this work is to aggregate data from cases of salt poisoning, combining existing data in the literature and describe the main clinical and pathological features observed. We reviewed five outbreaks, one of which was carefully monitored. In three of them the intake of sodium chloride had been determined. Clinical signs were basically seizures with the lateral decubitus with paddling movements. Circling was observed in some cases. Sodium determination in muscle of and liver fragments, serum, cerebrospinal fluid and aqueous humor showed increased concentrations of this ion. There was eosinopenia characterizing increased recruitment eosinophils from the circulation into the brain. In all outbreaks eosinophil infiltration was observed in the meninges and the Virchow-Robin space of the cerebral cortex. Cortical laminar necrosis was more pronounced in the brain of pigs from one of the outbreaks in which animals were sick for six days. The combination of these two lesions characterizes the disease. The changes observed result from high concentrations of sodium in the brain causing cause edema that leads to increased intracranial pressure and decreased perfusion to the brain tissue causing diffuse ischemia and neuronal necrosis, with consequent malacia.

Intoxicação por sal ocorre comumente em suínos por ingestão excessiva de cloreto de sódio ou por privação de água por um período de tempo, seguido de um livre acesso a água abundante. O objetivo deste trabalho é agregar dados de casos de intoxicação por sal, diagnosticados, compilar dados já existentes na literatura e caracterizar as principais alterações clínicas e patológicas observadas. Foram revisados cinco surtos, sendo que um deles foi minuciosamente acompanhado. Em três deles a ingestão de cloreto de sódio foi determinada. Os sinais clínicos eram basicamente convulsões, com intensos tremores musculares e desenvolvimento de opistótono. Os animais permaneciam em decúbito lateral, fazendo movimentos de pedalagem. Alguns andavam em círculos. Dosagens de sódio em fragmentos de músculo e de fígado, no soro, líquor e humor aquoso revelaram concentrações aumentadas do íon. A quantidade de eosinófilos circulantes foi baixa caracterizando grande recrutamento dessas células para o encéfalo. Em todos os surtos foi observada infiltração de eosinófilos nas leptomeninges e no espaço de Virchow-Robin do córtex cerebral. Necrose cortical laminar foi observada mais detalhadamente em um dos surtos onde os suínos estavam doentes há seis dias. A combinação dessas duas lesões caracteriza a doença. Todas as alterações observadas podem ser explicadas pela provável patogenia da doença em que as elevadas concentrações de sódio causam edema cerebral que leva ao aumento da pressão intracraniana e decréscimo da perfusão para o cérebro causando isquemia difusa e necrose neuronal, com consequente malacia.

Status epileticus em decorrência da meningoencefalite granulomatosa em cão / Status epileticus as a result in granulomatous meningoencephalitis in a dog

Meningoencefalite granulomatosa (MEG) é uma condição inflamatória do sistema nervoso central (SNC) de causa idiopática e ocorrência esporádica. A lesão pode ser disseminada, focal ou ocular e foi descrita primeiramente por Braund, Vandevelde e Walker em 1978. Afeta principalmente cães de raças toy como poodles e terriers, mas, também, pode ser vista em cães maiores. É principalmente uma doença de cães jovens a meia idade (de 1 a 8 anos), mas pode ocorrer em qualquer idade (BRAUND, 1985; ETTINGER et al, 2004; MUÑANA et al, 1998;). Alguns estudos não identificaram tais predileções (THOMAS, 1998). Foi atendido em uma clinica veterinária situada em Santa Maria (RS) um canino, fêmea, cor preta, raça Labrador Retriever, seis anos de idade e pesando 35 kg. O animal chegou à clínica com o relato de que havia convulsionado várias vezes até chegar ao consultório.

Molecular confirmation of ovine herpesvirus 2-induced malignant catarrhal fever lesions in cattle from Rio Grande do Norte, Brazil / Diagnóstico molecular de herpesvírus ovino tipo 2 em surto de febre catarral malígna em bovinos do Rio Grande do Norte

Molecular findings that confirmed the participation of ovine herpesvirus 2 (OVH-2) in the lesions that were consistent with those observed in malignant catarrhal fever of cattle are described. Three mixed-breed cattle from Rio Grande do Norte state demonstrated clinical manifestations that included mucopurulent nasal discharge, corneal opacity and motor incoordination. Routine necropsy examination demonstrated ulcerations and hemorrhage of the oral cavity, corneal opacity, and lymph node enlargement. Significant histopathological findings included widespread necrotizing vasculitis, non-suppurative meningoencephalitis, lymphocytic interstitial nephritis and hepatitis, and thrombosis. PCR assay performed on DNA extracted from kidney and mesenteric lymph node of one animal amplified a product of 423 base pairs corresponding to a target sequence within the ovine herpesvirus 2 (OVH-2) tegument protein gene. Direct sequencing of the PCR products, from extracted DNA of the kidney and mesenteric lymph node of one cow, amplified the partial nucleotide sequences (423 base pairs) of OVH-2 tegument protein gene. Blast analysis confirmed that these sequences have 98-100% identity with similar OVH-2 sequences deposited in GenBank. Phylogenetic analyses, based on the deduced amino acid sequences, demonstrated that the strain of OVH-2 circulating in ruminants from the Brazilian states of Rio Grande do Norte and Minas Gerais are similar to that identified in other geographical locations. These findings confirmed the active participation of OVH-2 in the classical manifestations of sheep associated malignant catarrhal fever.

Os achados moleculares confirmaram a participação do herpesvírus ovino tipo 2 (OVH-2) nas lesões observadas em um surto de febre catarral malígna em bovinos. Três bovinos oriundos de propriedade rural de Mossoró, Rio Grande do Norte apresentaram manifestações clínicas, que incluíram secreção nasal mucopurulenta, opacidade da córnea e incoordenação motora. A necropsia revelou ulcerações e hemorragias da cavidade oral, opacidade da córnea e linfonodomegalia. Os achados histopatológicos significativos incluíam vasculite necrosante generalizada, meningoencefalite não supurativa, nefrite intersticial linfocítica, hepatite linfocítica e trombose. A PCR, realizada a partir de DNA extraído do rim e do linfonodo mesentérico de um dos animais, amplificou um produto com 423 pares de base do gene da proteína do tegumento do herpesvírus ovino 2 (OVH-2). O sequenciamento direto dos produtos da PCR e a análise pelo Blast demonstraram que o produto amplificado apresentava 98-100% de identidade com sequências do OVH-2 depositadas no GenBank. As análises filogenéticas, baseadas nas sequências deduzidas de aminoácidos demonstraram que a cepa de OVH-2 circulando em ruminantes nos estados de Rio Grande do Norte e Minas Gerais são semelhantes àquelas identificadas em outras regiões geográficas. Esses achados confirmam a participação ativa de OVH-2 nas manifestações clássicas de febre catarral maligna em ovinos.

Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica / Molecular detection of bovine herpesvirus 1 and 5 in formalin-fixed, paraffin-embedded samples from cattle with neurological disease

A infecção por herpesvírus bovino (BoHV) é uma das principais causas de doença neurológica em bovinos na região Centro-Oeste do Brasil. O uso de técnicas moleculares de diagnóstico representa uma contribuição importante para o estudo dessa doença. Este trabalho descreve o uso de uma técnica específica de PCR multiplex para identificar BoHV-5 e BoHV-1 em 76 amostras de encéfalo de bovinos fixadas em formol e incluídas em parafina. Com base nas alterações histológicas, as amostras foram separadas em 2 grupos: o Grupo 1 era composto de 40 amostras de bovinos com meningoencefalite necrosante característica da infecção por BoHV; no Grupo 2 estavam 36 amostras de casos com encefalite não-supurativa inespecífica. Identificação de BoHV-5 foi constatada em 40 por cento das amostras do grupo 1 e em 33 por cento das amostras do grupo 2. Não houve amplificação de DNA de BoHV-1 em nenhuma amostra.

Bovine herpesvirus (BoHV) is an important cause of neurological disease in cattle in the Midwest Brazil. The application of molecular diagnostic techniques represents an important contribution for the study of BoHV. This paper describes the detection of BoHV-5 and BoHV-1 by a specific multiplex PCR assay in 76 paraffin-embedded samples from central nervous system (CNS) of cattle with neurological disorders. The samples were divided into 2 groups according to the histological features: Group 1 was composed of 40 cases of necrotizing meningoencephalitis (characteristic of BoHV infection), and Group 2 was composed of 36 cases of nonspecific nonsuppurative meningoencephalitis. Positive results for BoHV-5 accounted for 40 percent of the samples in the group 1 and 33 percent in the group 2. No detection of BoHV-1 was recorded.

Granulomatous meningomyeloencephalitis in a calf caused by Mycobacterium bovis / Meningomieloencefalite granulomatosa em um bezerro, causada por Mycobacterium bovis

Bovine tuberculosis is a chronic disease caused by Mycobacterium bovis, characterized by respiratory disorders, emaciation and lymphadenomegaly. Neurological signs associated with granulomatous lesions in the central nervous system are rarely seen. In Brazil, the National Program for Control and Eradication of bovine tuberculosis has begun in 2001, and notification of the disease is compulsory. A case of tuberculous meningomyeloencephalitis is reported in a dairy calf less than one year old presenting neurological signs (irritability, aggressiveness, weakness, dizziness and recumbency) which progressed to death in three days. Brain, spinal cord, and lung tissue samples were examined histopathologically. The spinal cord showed granulomatous meningomyelitis with Langhans giant cells in the meninges and perivascular mononuclear cuffing in the white and gray matter. There were a few granulomas in the cerebral cortex with a central area of necrosis surrounded by mononuclear infiltrate. Mononuclear perivascular cuffing, satellitosis, hyperemia, and severe granulomatous meningitis with Langhans giant cells were observed in the neuropile. Samples of brain were inoculated into Petragnani and Stonebrink media. M. bovis was isolated and identified by PCR with JB21-JB22 primers. Considering the 2,888 samples of bovine CNS sent for surveillance of neurological syndrome and negative for Rabies, this was the only case of tuberculous meningomyeloencephalitis (0,035%) diagnosed from 2004 to 2008 by the Laboratory of Anatomopathology of Instituto Biológico. Although tuberculous meningomyeloencephalitis is not so frequent, it's important to diagnose M. bovis as a causative agent of bovine neurological disorders. In accordance with Brazilian regulations, sanitary measures in the infected herd (test-and-slaughter) should be adopted.

A tuberculose bovina é uma doença crônica causada por Mycobacterium bovis, caracterizada por desordens respiratórias, emaciação e linfadenomegalia. Em raros casos, sinais neurológicos associados com lesões granulomatosas no sistema nervoso central são observados. O Brasil iniciou o Programa Nacional para Controle e Erradicação dessa doença em 2001, tornando a notificação compulsória. Um caso de meningomieloencefalite tuberculosa é relatado em uma bezerra leiteira com um ano de idade, que apresentou sinais neurológicos (irritabilidade e agressividade, fraqueza e tontura, decúbito) que progrediram para morte em três dias. A medula espinhal apresentou meningomielite granulomatosa, com células gigantes tipo Langhans nas meninges e manguito perivascular mononuclear na substância branca e cinzenta. Havia alguns granulomas no córtex cerebral, com área central de necrose circundada por infiltrado mononuclear. No neurópilo observou-se manguito perivascular mononuclear, satelitose, hiperemia e severa meningite granulomatosa com células gigantes tipo Langhans. Amostras de cérebro foram inoculadas nos meios de cultivo Petragnani e Stonebrink e M. bovis foi isolado e identificado por PCR com primers JB21-JB22. Considerando as 2.888 amostras de SNC bovino enviadas para a vigilância epidemiológica de síndrome neurológica e negativas para raiva, este foi o único caso (0,035%) de meningomieloencefalite tuberculosa diagnosticado pelo Laboratório de Anatomia Patológica do Instituto Biológico no período de 2004 a 2008. Embora a meningomieloencefalite tuberculosa não seja tão freqüente, é importante incluir a infecção por M. bovis no diagnóstico diferencial de lesões do sistema nervoso central de bovinos. De acordo com a legislação brasileira, medidas sanitárias no rebanho infectado (teste e abate) devem ser adotadas.

Meningoencefalitis zigomicótica piogranulomatosa en un puercoespín de cola pren sil (Coendou prehensilis) / Piogranulomatous zygomycotic meningoencephalitisb in a prehensile tailed porcupine (Coendou prehensilis)

Con el término de zigomicosis (ZM) se designa un grupo de enfermedades causadas por hongos de la clase Zygomicetes, de los órdenes Mucorales y Entomophthorales, de varios géneros y especies. La presentación de ZM en animales ocurre esporádicamente en numerosas especies tanto en animales domésticos como silvestres (incluso en mamíferos marinos) y son pocos los casos comprobados de aislamiento e identificación del agente causal. Pocos hongos son considerados como neurotrópicos ya que tienden a localizarse en el SNC después de invadir el hospedador; sin embargo, la mayoría de los casos de meningitis o meningoencefalomielitis son parte de micosis sistémicas como la Candidiasis, la Criptococosis, la Aspergilosis o la ZM. El presente trabajo documenta el hallazgo de una meningoencefalitis zigomicotica secundaria a un trauma craneoencefálico en un puercoespín de cola prensil (Coendou prehensilis), siendo una enfermedad rara infrecuente en el sistema nervioso central tanto en humanos como en animales y adicionalmente sin reportes previos en esta especie.

With the word Zygomycosis (ZM) are designating a group of diseases caused by fungi of the class Zygomicetes, the orders Mucorales and Entomophthorales, of several genera and species. The presentation of ZM in animals occurs sporadically in many species both in domestic and wild animals (including marine mammals), and are checked few cases of isolation and identification of the causative agent. Few fungi are considered to be neurotropic because they tend to be located in the CNS after invading the host; however, most cases of meningitis or meningoencephalomyelitis are part of systemic fungal infection such as Candidiasis, Cryptococcosis, Aspergillosis or ZM. This paper documents the discovery of a zigomicotic meningoencephalomyelitis secondary to a head trauma in a prehensile-tailed porcupine (Coendou prehensilis), being a rare disease infrequent in the central nervous system both in human and animals and additionally without previous reports in this specie.

Experimental infection of rabbits with a recombinant bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) gI, gE and US9-negative / Infecção experimental de coelhos com um recombinante do herpesvírus bovino tipo 5 defectivo na gI, gE e US9

Bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) is a major cause of viral meningoencephalitis in cattle. The expression of different viral proteins has been associated with BoHV-5 neuropathogenesis. Among these, gI, gE and US9 have been considered essential for the production of neurological disease in infected animals. To evaluate the role of gI, gE and US9 in neurovirulence, a recombinant from which the respective genes were deleted (BoHV-5 gI-/gE-/US9-) was constructed and inoculated in rabbits of two age groups (four and eight weeks-old). When the recombinant virus was inoculated through the paranasal sinuses of four weeks-old rabbits, neurological disease was observed and death was the outcome in 4 out of 13 (30.7 percent) animals, whereas clinical signs and death were observed in 11/13 (84.6 percent) of rabbits infected with the parental virus. In eight weeks-old rabbits, the BoHV-5 gI-/gE-/US9- did not induce clinically apparent disease and could not be reactivated after dexamethasone administration, whereas wild type BoHV-5 caused disease in 55.5 percent of the animals and was reactivated. These findings reveal that the simultaneous deletion of gI, gE and US9 genes did reduce but did not completely abolish the neurovirulence of BoHV-5 in rabbits, indicating that other viral genes may also play a role in the induction of neurological disease.

O herpesvírus bovino tipo 5 é uma das principais causas de meningoencefalite viral em bovinos. A expressão de diferentes proteínas virais tem sido associada à neuropatogenia do BoHV-5. Entre estas, a gI, gE e US9 têm sido consideradas essenciais para a indução de sinais neurológicos nos animais infectados. Para avaliar o papel das proteínas gI, gE e US9 na neurovirulência, construiu-se um recombinante no qual os genes que codificam estas proteínas foram deletados, denominado BoHV-5 gI-/gE-/US9-. Este vírus foi inoculado em coelhos de idades diferentes (quatro e oito semanas de idade). Quando o vírus recombinante foi inoculado nos seios paranasais de coelhos de quatro semanas de idade, doença neurológica e morte foram observadas em 4 dos 13 (30,7 por cento) animais, enquanto que sinais clínicos e morte foram observados em 11/13 (84,6 por cento) dos coelhos infectados com o vírus parental. Em coelhos de oito semanas de idade, o BoHV-5 gI-/gE-/US9- não induziu sinais clínicos aparentes e, após tentativa de reativação viral por tratamento com dexametasona, o vírus não foi re-excretado. Por outro lado, o vírus selvagem causou doença clínica em 55,5 por cento dos coelhos e foi re-excretado após tratamento com dexametasona. Estes achados revelam que a deleção simultânea dos genes gI, gE e US9 reduziu mas não aboliu completamente a neurovirulência do BoHV-5 em coelhos, indicando que outros genes virais possam ter papel na indução da doença neurológica.

Meningoencefalite por Herpesvirus bovino 5 em Minas Gerais: relato de caso clínico / Meningoencephalitis by Bovine herpesvirus 5 in Minas Gerais state: clinical case report

Relata-se um caso de meningoencefalite causada por Herpesvirus bovino 5 (BoHV-5) heritabilityem uma vaca com cinco anos de idade. O animal manifestou quadro clínico inicial de síndrome medular baixa, caracterizada por incoordenação dos membros pélvicos, sinais estes ainda não descritos para a enfermidade. Dentro de pouco tempo a doença evoluiu para síndrome cerebral, e o óbito ocorreu seis dias após o inicio dos sintomas. Na histopatologia, evidenciou-se meningoencefalite difusa, não supurada, e a confirmação do diagnóstico foi feita por reação em cadeia de polimerase e sequenciamento do segmento parcial da glicoproteína G do vírus. O trabalho confirma a presença do BoHV-5 em Minas Gerais, descreve características clínicas novas para a enfermidade e ressalta sua importância no diagnóstico diferencial das neuropatias bovinas.

A clinical case of meningoencephalitis by Bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) in a five-year-old cow was reported. The disease began with low spinal cord signs, characterized by incoordination, and these symptoms had never been related to this illness before. Signs of a brain syndrome were observed and the cow died in six days. At the histopathology, a spread non-supurative meningoencephalitis was diagnosed, and the virus identification was made by PCR and partial sequence of the glycoprotein G. This study confirm the BoHV-5 presence in the State of Minas Gerais, Brazil, describes new clinic characteristics, and show the importance of the disease in the differentiate diagnosis with others bovine central nervous system affections.

Meningoencephalitis in a horse associated with equine herpesvirus 1 / Meningoencefalite em um cavalo associado com herpesvírus eqüino 1

Um garanhão da raça Brasileiro de Hipismo, de 12 anos de idade, apresentou um quadro neurológico complexo, que se assemelhava, em vários aspectos, aos sinais neurológicos causados pelo herpesvírus eqüino 1 (EHV-1), variando desde uma suave ataxia à completa paralisia dos posteriores. O animal morreu com menos de 12 horas após o início dos sinais nervosos. O diagnóstico de EHV-1 foi feito pela detecção do DNA viral no sistema nervoso central por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR) e posterior sequenciamento.

Astrocytic and microglial response and histopathological changes in the brain of horses with experimental chronic Trypanosoma evansi infection / Resposta astrocítica e microglial e alterações histopatológicas no sistema nervoso central de eqüinos infectados cronicamente com Trypanosoma evansi

This study aimed to characterize astrocytic and microglial response in the central nervous system (CNS) of equines experimentally infected with T. evansi. The experimental group comprised males and females with various degrees of crossbreeding, ages between four and seven years. The animals were inoculated intravenously with 10(6) trypomastigotes of T. evansi originally isolated from a naturally infected dog. All equines inoculated with T. evansi were observed until they presented symptoms of CNS disturbance, characterized by motor incoordination of the pelvic limbs, which occurred 67 days after inoculation (DAI) and 124 DAI. The animals in the control group did not present any clinical symptom and were observed up to the 125th DAI. For this purpose the HE histochemical stain and the avidin biotin peroxidase method was used. Lesions in the CNS of experimentally infected horses were those of a wide spread non suppurative meningoencephalomyelitis.The severity of lesions varied in different parts of the nervous system, reflecting an irregular distribution of inflammatory vascular changes. The infiltration of mononuclear cells was associated with anisomorphic gliosis and reactive microglia was identified. The intensity of the astrocytic response in the CNS of the equines infected by T. evansi characterizes the importance of the performance of these cells in this trypanosomiasis. The characteristic gliosis observed in the animals in this experiment suggests the ability of these cells as mediators of immune response. The parasite, T. evansi, was not identified in the nervous tissues.

Este estudo objetivou caracterizar a participação astrocítica e microglial no sistema nervoso central (SNC) de eqüinos experimentalmente infectados com T. evansi. O grupo experimental foi formado por machos e fêmeas com vários graus de cruzamentos e idade variando entre quatro e sete anos. Os animais foram inoculados com 10(6) tripomastigotas de T. evansi, originalmente isolada de um cão infectado naturalmente. Todos os eqüinos inoculados foram observados até o aparecimento dos sintomas neurológicos, caracterizados por incoordenação motora dos membros pélvicos, o qual ocorreu entre 67 e 124 dias após a inoculação (DPI). Os animais do grupo controle não apresentaram sinais clínicos e foram observados até o 125º DPI. Para este propósito, foram utilizados os métodos histoquímicos (HE) e imunoistoquímicos do complexo avidina-biotina peroxidase (ABC). A lesão no sistema nervoso central (SNC) dos eqüinos infectados com T. evansi foi caracterizada como meningoencefalomielite não supurativa. A gravidade das lesões variou em diferentes segmentos do SNC, refletindo distribuição irregular das alterações vasculares. Infiltrado perivascular e meníngeo foi associado a gliose anisomórfica e microgliose reativa. A intensidade da resposta astrocítica no SNC dos equinos infectados com T. evansi caracteriza a importância da performance destas células nas tripanossomíases. A gliose observada nos animais deste experimento sugerem a habilidade destas células como mediadoras da resposta imune. T. evansi não foi identificado no parênquima do SNC.

Meningoencefalite necrotizante de cão Maltês / Necrotizing meningoencephalitis of Maltese dog

A Meningoencefalite Necrotizante (MEN) é uma encefalopatia causada por uma disfunção inflamatória de característica necrotizante. O objetivo deste relato é descrever os aspectos clínicos e anatomopatológicos da Meningoencefalite Necrotizante (MEN) em um cão Maltês. A doença tem um caráter necrótico único e está relacionada intimamente à Encefalite do Cão Pug (ECP) devido a suas semelhanças, bem como à Leucoencefalite Necrotizante (LEN). Embora o primeiro relato de caso de ECP tenha mais de 15 anos e o primeiro relato de caso de MEN em Maltês tenha 11 anos, há muito a ser revelado sobre a etiologia e os mecanismos imunopatológicos da doença. Neste trabalho, relata-se o caso de um cão Maltês com sinais que foram compatíveis com a MEN. Foram detectadas nas imagens macroscópicas, cavitação cerebral, e na microscopia, perda de células do parênquima em certas regiões do córtex cerebral. A partir dessas descobertas descreve-se o primeiro caso de MEN em cão Maltês no Brasil.

The Necrotizing Meningoencephalitis (NME) is an encephalopathy caused by an inflammatory dysfunction with necrotic characterization. The aim of this report is to describe the anatomopathological features of the NME in a Maltese dog. The disease has a unique necrotic pattern and is closely related to Pug Dog Encephalitis (PDE) because of their similarity as well as to Necrotizing Leukoencephalitis (NLE). Although the first PDE report has more than 15 years and the first Maltese NME report has 11 years there is a lot to be unveiled about the etiologic and the immunopathologic mechanisms of the disease. Here we report one case of a Maltese dog with signs that were compatible with NME. The gross morphology pictures with the cerebral cavitation and the histological loss of parenchymal cells in some regions of the cerebral cortex were detected. Based on these findings, we describe the first case of NME in Maltese dog in Brazil.

Meningoencefalite por herpesvírus bovino-5 / Meningoencephalitis by bovine herpesvirus-5

A meningoencefalite por herpesvírus bovino-5 (BoHV-5) é uma doença infecto-contagiosa, aguda ou subaguda, geralmente fatal e que afeta principalmente bovinos jovens submetidos a situações de estresse. A doença tem sido freqüentemente diagnosticada em várias regiões do Brasil e em outras partes do mundo. BoHV-5 é um vírus da família Herpesviridae e subfamília Alphaherpesvirinae e possui como genoma uma molécula de DNA fita dupla. Esses vírus são caracterizados por rápida replicação em cultivo, que resulta em lise das células infectadas, e afetam várias espécies de hospedeiros, estabelecendo latência principalmente em neurônios de gânglios sensoriais. A transmissão de BoHV-5 ocorre principalmente por contato direto ou indireto entre bovinos. Após a replicação primária nas mucosas oral, nasal, ocular e orofaríngea, o vírus invade as terminações nervosas e é transportado até os neurônios de gânglios sensoriais, onde replica ativamente e estabelece latência. A invasão viral do encéfalo pode resultar em replicação viral massiva e produção de doença neurológica. A maioria dos bovinos que desenvolvem doença neurológica morre em decorrência de meningo-encefalite, porém alguns podem desenvolver infecção subclínica e, após recuperação, permanecerem portadores da infecção latente. A disseminação viral nos rebanhos é facilitada em situações de grande concentração de animais, introdução de bovinos e desmame de lotes de bezerros em idade que coincide com o decréscimo da imunidade passiva. Certas condições, naturais ou induzidas, podem reativar o vírus do estado latente e propiciar condições para sua transmissão e disseminação a outros indivíduos. A doença pode ocorrer na forma de surtos ou em casos isolados, com coeficientes de morbidade que podem variar de 0,05 por cento-5 por cento; a letalidade é quase sempre de 100 por cento. Os sinais clínicos incluem depressão, descarga nasal e ocular, ranger de dentes, andar em círculos, cegueira, febre, movimentos...

Meningoencephalitis caused by bovine herpesvirus-5 (BoHV-5) is an often fatal, acute or subacute infectious disease that affects mainly young cattle under stressing conditions. The disease has been recognized in several Brazilian regions and in other parts of the world. BoHV-5 is a double stranded DNA virus member of the Herpesviridae family and subfamily Alphaherpesvirinae. The virus is characterized by rapid and lytic replication in cell cultures and by the ability to establish lifelong latent infection in sensory nerve ganglia of the host. BoHV-5 is transmitted mainly by direct and indirect contact and replicates acutely in the oral, nasal, oropharingeal or ocular mucosae. After primary replication, the virus invades nerve endings and is transported to the neuron cell bodies of the sensory ganglia where it replicates actively and/or establishes latency. Viral invasion of the brain may result in massive virus replication and production of neurological disease. Virtually all cattle developing neurological disease die of meningoencephalitis; yet the infection may be subclinical in some animals. These animals recover and become latently infected. Viral dissemination within a herd is facilitated by conditions such as crowding, introduction of cattle from other herds and weaning of calves in ages that coincide with decrease of passive immunity. Certain natural or induced conditions may reactivate the latent virus and favor its transmission and dissemination to other susceptible individuals. The disease may occur as outbreaks or as sporadic cases, with morbidity rates ranging of 0.05 percent-5 percent; lethality is almost always 100 percent. Clinical signs include depression, nasal and ocular discharge, grinding of teeth, circling, blindness, fever, paddling movements, disphagia, abdominal pain, nystagmus, muscle tremors, drooling, incoordinated gait, opisthotonus, head pressing, falls and convulsions. Clinical course is usually...

O Herpesvírus bovino tipo 5 ( BoHV-5 ) pode utilizar as rotas olfatória ou trigeminal para invadir o sistema nervoso central de coelhos, dependendo da via de inoculação / Bovine herpesvirus 5 may use the olfactory and trigeminal pathways to invade the central nervous system of rabbits, depending upon the route of inoculation

O herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) é um agente importante de meningoencefalite em bovinos. Após replicação na mucosa nasal, acredita-se que o vírus invada o cérebro principalmente pela via olfatória. Para investigar a importância dessa via na patogenia da infecção neurológica em um modelo animal, coelhos recém-desmamados (30 dias) foram submetidos à ablação cirúrgica dos bulbos olfatórios (BOs) e posteriormente inoculados pela via intranasal (IN) ou no saco conjuntival (IC) com uma cepa altamente neurovirulenta do BoHV-5 (SV-507). Após inoculação IN, 10/10 coelhos no Grupo Controle (com BOs) desenvolveram enfermidade neurológica, com início dos sinais clínicos entre os dias 5 e 10 pós-inoculação (pi) (média de 7,5 dias); em contraste, no grupo submetido à ablação dos BOs (n=11), apenas um animal (9,1 por cento) desenvolveu doença neurológica (início no dia 17pi). Administração de dexametasona aos animais sobreviventes (n=10) no dia 50 pi resultou em excreção viral em secreções nasais e/ou oculares por oito destes, demonstrando que o vírus foi capaz de atingir o gânglio trigêmeo (TG) durante a infecção aguda. Esses resultados demonstram que a rota olfatória representa a via principal, mas não única, de acesso ao cérebro de coelhos após inoculação IN. Para investigar o papel de uma segunda possível via de acesso, grupos de coelhos controle (n=12) ou submetidos à ablação dos BOs (n=12) foram inoculados no saco conjuntival (IC), após o qual o vírus poderia utilizar o ramo oftálmico do nervo trigêmeo para invadir o cérebro. Dez coelhos controle (83,3 por cento) desenvolveram doença neurológica após inoculação IC, com início dos sinais entre os dias 11 e 20 (média 15,3 dias). A ablação prévia dos BOs não afetou a freqüência ou o curso da doença neurológica nesse grupo: 10/12 coelhos (83,3 por cento) sem os BOs desenvolveram a doença neurológica, com os sinais iniciando entre os dias 9 e 15pi (média 12,7 dias). Esses resultados demonstram que tanto a via olfatória como a trigeminal podem servir de acesso para o BoHV-5 invadir o cérebro de coelhos inoculados experimentalmente, dependendo da via de inoculação. Inoculação IN resulta em um transporte rápido e eficiente pela via olfatória; com a via trigeminal servindo de acesso mais lento e menos eficiente. Inoculação IC resulta em transporte e invasão eficientes, porém mais tardios, provavelmente pela via trigeminal.